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你知道核酸檢測實驗室是如何運作的嗎?

來源: 發(fā)布日期:2020-11-25

  PCR核酸檢測實驗室根據(jù)國家《醫(yī)學生物安全二級實驗室建筑技術標準》進行建設,核酸檢測實驗室共分為試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)四個區(qū)域。實驗室內配置全自動核酸提取儀、實時熒光定量PCR儀、擴增儀等儀器,消毒和防護設施齊全,符合相關生物實驗室安全標準。此外,為防止實驗室外的地方被污染,實驗室的氣壓均為負壓,有效降低感染風險。

   實驗室的三個區(qū)域試劑準備區(qū)、標本處理區(qū)、擴增區(qū)很重要。檢測人員們需要在一區(qū)配制好試劑,通過傳遞窗送至二區(qū),在二區(qū)進行樣本核酸提取,之后再送到擴增區(qū)進行基因擴增反應,等待檢測結果……整個流程單向進行。

   在試劑準備區(qū),檢測人員在超凈工作臺前手持鑷子和加樣槍,將三種不同劑量的試劑從一管管試劑瓶中抽出、混合,精準加入96孔板……所有試劑配制完畢后,連同提取盒、加樣槍等統(tǒng)一放到連通一區(qū)和二區(qū)的傳遞窗里。待一區(qū)的窗門關好后,位于二區(qū)的操作人員才可以打開另一側的窗門,將試劑取出。


  在二區(qū)進行的提取加樣環(huán)節(jié),需要檢測人員直接面對樣本,在操作中會面臨氣溶膠傳染的風險,是最關鍵也是最危險的一步,因此二區(qū)內檢測人員必須嚴格三級防護,戴雙層手套,在生物安全柜中操作。在“全副武裝”以及“負壓”的狀態(tài)下,進行長時間、高強度的工作,對每個檢測人員來說,都是一項不小的體力考驗。

  為了快速、準確地對人群進行大面積篩選工作,同仁醫(yī)院檢驗科采取“三人混檢”,一次同時進行3份樣本混合檢測,如果混合樣本出現(xiàn)陽性,再分別對“混檢”的單一樣本進行檢測。因此,在核酸提取加樣環(huán)節(jié),檢測人員需要先將所有樣本進行雙份樣品標記,再每三個一組,加入到盛有核酸提取試劑的96孔板,每個孔細密排列,每個加樣環(huán)節(jié)都以微升為單位,每一步操作,都要投入三倍的耐心和忍受力,容不得一點馬虎。


  幾個小時后,全部樣本的核酸提取、與擴增檢測試劑混合完畢,配置成 PCR 反應體系,再經(jīng)傳遞窗到擴增區(qū)進行核酸擴增檢測。擴增區(qū)內,3臺擴增檢測儀高速運轉,電腦屏幕上,隨著一條條內參曲線的出現(xiàn),檢測人員可以暫時放下懸著的心。如果樣本檢測為陽性,便會有兩項指標呈現(xiàn)出S形曲線;如果檢測結果為陰性,結果顯示為一條直線。

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